我們在收到細胞后首先應該對細胞進行細胞活化︰
檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形，若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養(yǎng)，或立即冷凍保存(置于–70 °c，隔夜后，移到liq n2)。
然后需對凍細胞進行解凍
1、依據細胞株數據單zhi定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它zhi定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。
2、fbs (fetal bovine serum, 胚牛血清), cs (calf serum, 小牛血清)和hs (horse serum, 馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據細胞株資料單zhi定之血清種類培養(yǎng)之。
3、將培養(yǎng)基置于37 °c 水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入37 °c 水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化后，以70%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺。
4、依據細胞種類和濃度，于無菌操作臺內取10 ml培養(yǎng)基加至t25 或t75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入t25或t75 flask 內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入37 °c，5 % co2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
5、對絕大多數細胞而言，1 % 以下之冷凍保護劑dmso，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍.細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。
極少數因對dmso 敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除dmso 者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中，離心300 xg (約1000 rpm)，5 分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入37 °c，5 % co2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
關鍵詞：培養(yǎng)箱