超微量分光光度計(jì)是一類(lèi)很重要的分析儀器,無(wú)論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測(cè)、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門(mén),超微量分光光度計(jì)都有廣泛而重要的應(yīng)用。超微量分光光度計(jì)就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。
超微量分光光度計(jì)目前成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)等領(lǐng)域。應(yīng)用液體的表面張力特性,檢測(cè)時(shí)經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑,達(dá)到快速、微量、高濃度檢測(cè)吸光度的特點(diǎn)。
超微量分光光度計(jì)常用于定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈dna,以及rna。核酸的zui高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類(lèi)型的核酸,事先要選擇對(duì)應(yīng)的系數(shù)。如:1od的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsdna,37μg/ml的ssdna,40μg/ml的rna,30μg/ml的olig。測(cè)試后的吸光值經(jīng)過(guò)上述系數(shù)的換算,從而得出相應(yīng)的樣品濃度。
超微量分光光度計(jì)與傳統(tǒng)分光光度計(jì)相比,優(yōu)點(diǎn)在于:
(1)所需樣品體積小,僅需1—2μl;
(2)不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測(cè)平臺(tái)上,測(cè)量時(shí)樣品自動(dòng)形成液柱,檢測(cè)完成后只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測(cè)平臺(tái)上擦拭干凈即可,避免了因?yàn)楸壬笄逑床粌魩?lái)的交叉污染;
(3)一般具有多個(gè)光程,而傳統(tǒng)分光光度計(jì)的光程為10mm,超微量分光光度計(jì)樣品無(wú)需稀釋?zhuān)瑴y(cè)量范圍可達(dá)到常規(guī)分光光度計(jì)的50倍;
(4)氙氣閃光燈為燈源,代替了氘燈(紫外)和鎢燈(可見(jiàn)),使用壽命更長(zhǎng);
(5)不需要預(yù)熱,可隨時(shí)檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間短;
(6)顯示吸光度值的同時(shí),程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料);
(7)占據(jù)實(shí)驗(yàn)室空間體積比傳統(tǒng)分光光度計(jì)小很多。