雙波長消去法測定復(fù)方制劑安痛定中的含量
a. 實驗原理
經(jīng)典雙光束分光光度法中，入射光是同一波長的單色光分別通過吸收池和參比池，得到的信號是相對于參比溶液吸收為零的吸光度。由于吸收池位置、吸收池常數(shù)、待測溶液和參比溶液之間渾濁度、溶液組成等因素的差別影響，可能引起較大誤差。雙波長分光光度法克服了經(jīng)典單波長分光光度法的缺點。在雙波長分光光度法中，從光源發(fā)射出來的光線分別經(jīng)過兩個單色器（光柵）后，得到兩束具有不同波長的彈色光，利用斬光器使這兩束單色光交替通過同一待測溶液，得到的信號是待測溶液對兩種單色光的吸光度差值?？蓽y定渾濁溶液，也可測定吸收光譜重疊的混合組分。
安痛定注射液中主要成分為、和。檢測的紫外分光光度定量方法有雙波長消去法、系數(shù)倍率法、最小二乘法、卡爾曼濾波分光光度法等。本實驗采用雙波長消去法測定其中組分的含量。
安痛定的成分組成：每2 ml內(nèi)含0.100 g，0.018 g，0.040 g。
b. 儀器、試劑
1．儀器
uv-2450紫外可見分光光度計：電子天平。
石英吸收池；容量瓶(100 ml、2000 ml);吸量管(1.0 ml)。
2．試劑
（純品）；（純品）：（純品）：鹽酪（分析純）：安痛定注射液。
c. 實驗步驟
1．溶液配制
分別取、、純品，準(zhǔn)確稱量，用0.1 mol·l^-1鹽酸準(zhǔn)確配制100 ml濃度為0.015 mg·ml^-1的溶液。
2．儀器自檢
接通電源，儀器預(yù)熱20 min，然后進(jìn)行自檢；聯(lián)機自檢結(jié)束，儀器進(jìn)入測試狀態(tài)。
3．測試步驟
(1)在應(yīng)用程序菜單下選擇“定性測試”，單擊。
(2)設(shè)置掃描參數(shù)：通過掃描參數(shù)設(shè)置操作界面，設(shè)置掃描方式(a)、掃描次數(shù)(1)、掃描精度(1 nm)、起始波長(220 nm)、終止波長(400 nm)、坐標(biāo)下限（-0.1）和坐標(biāo)上限(3)，單擊“確定”。
(3)建立基線：在光度計的樣品槽內(nèi)放入?yún)⒈热芤海?.1 mol·l^-1鹽酸），在“附屬功能”菜單下單擊“建立儀器基線”（或單擊界面的“scan baseline”），在對話框內(nèi)輸入起始波長(220 nm)和終止波長(400 nm)，單擊“確定”。
(4)在定性分析圖譜操作界面，選擇掃描方式吸光度和掃描信道1，單擊。
(5)λ1的測定：取純品，準(zhǔn)確稱量，用0.1 mol·l^-1鹽酸準(zhǔn)確配制100 ml含12～1.3 mg的溶液，計算百分濃度值（準(zhǔn)確至相對誤差小于1%）。用鹽酸作參比溶液調(diào)“0”和“99%”，然后把配制好的溶液放入樣品槽，對準(zhǔn)光路，單擊“掃描”，得的掃描圖譜，取波峰處為λ1。單擊“數(shù)據(jù)表”，記入此處ala和λ1值。
(6)λ2的測定：取純品，用0.1 mol·l^-1鹽酸配制成濃度為0.015 mg·ml^-1的溶液（不必準(zhǔn)確）。選擇掃描信道2，單擊，把配制好的溶液放入樣品槽，對準(zhǔn)光路，單擊“掃描”，得的掃描圖譜。在“可選通道”選通道1，單擊“圖譜合”，得和的組合圖譜。以λ1處作縱軸的平行線與圖譜有交叉點，單擊“數(shù)據(jù)表”，記入此交叉點的爿a1b值。再從數(shù)據(jù)表中找出與a1b值相等或近似相等的a2b，此處的波長作為λ2。
(7)δa的測定：選擇掃描信道1，單擊，再單擊“數(shù)據(jù)表”，查找λ2處的的吸光度值a2a，求出δa。根據(jù)公式δε=δa/c計算出δε。
(8)取純品，用0.1 mol·l^-1鹽酸配制成濃度為0.015 mg·ml^-1的溶液（不必準(zhǔn)確）。選擇掃描信道3，單擊，把配制好的溶液放入樣品槽，對準(zhǔn)光路，單擊“掃描”，的掃描圖譜。在“可選通道”選通道2，單擊“圖譜組合”，得、氨基林和的組合圖譜，觀察在所選波長范圍內(nèi)的吸收情況。
(9)安痛定注射液中的測定：準(zhǔn)確吸取樣品1.00毗，用0.1 mol·l^-1鹽酸準(zhǔn)確稀釋2000倍，含約0.002%。在λ1和λ2處測定吸光度，計算出其δa值，并計算其濃度：c=δa/δε，再將濃度換成樣品的含量與標(biāo)示量的比值。
(10)了解軟件的其他功能，記錄相關(guān)數(shù)據(jù)、打印圖譜；結(jié)束儀器操作。
d. 注意事項
(1)待測試樣溶液濃度除已有注明外，其吸收度以0.3～0.7為宜。
(2)取吸收池時，手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè)，盛裝樣品以池體的4/5為度，使用揮性溶液時應(yīng)加蓋。透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應(yīng)無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑i或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
(3)選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于待測樣品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度值會偏低。對于大部分待測樣品，可以使用2 nm狹縫寬度。
上海讓奇儀器科技有限公司是紫外可見分光光度計、紫外分光光度計、分光光度計等實驗室分析儀器的研發(fā)、設(shè)計、生產(chǎn)及銷售的廠家和經(jīng)銷商。產(chǎn)品有g(shù)9系列雙光束掃描型紫外可見分光光度計、d8系列準(zhǔn)雙光束掃描型紫外可見分光光度計、d7比例監(jiān)測雙光束紫外可見分光光度計、t6系列紫外可見分光光度計、k5系列可見分光光度計等g、d、t、k四大系列。