服務(wù)介紹：
edu(5-ethynyl-2’- deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(t)滲入正在復(fù)制的dna分子中，通過基于edu與apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞dna復(fù)制活性，適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、dna修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：
實(shí)驗(yàn)流程： 1.每孔加入2 mg/mlglycine，脫色搖床孵育5分鐘后，棄glycine溶液;
注：作用是中和多聚甲醛，當(dāng)采用其他方式進(jìn)行細(xì)胞固定時(shí)可省略此步驟;
2.每孔加入100 μl pbs，脫色搖床清洗5分鐘，棄pbs;
3.每孔加入100μl滲透劑(0.5% tritonx-100的pbs)脫色搖床孵育10分鐘;pbs清洗1次，5分鐘。
注：當(dāng)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行其他抗體染色，或由于某些細(xì)胞類型對染料的吸附性較高，可能需要增強(qiáng)細(xì)胞膜通透性。
4.每孔加入100 μl的1x apollo®染色反應(yīng)液，避光、室溫、脫色搖床孵育30分鐘后，棄染色反應(yīng)液;
5.加入100 μl滲透劑(0.5% tritonx-100的pbs)脫色搖床清洗2~3次，每次10分鐘，棄滲透劑;
6.(加強(qiáng))每孔每次加入100 μl甲醇清洗1~2次，每次5分鐘;pbs清洗1次，每次5分鐘。
注：由于某些細(xì)胞對染料的吸附性較高，需采用加強(qiáng)方式洗脫以降低染料背景。
染dapi，封片，鏡檢。
樣本運(yùn)輸要求： 1.組織樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上，常溫運(yùn)輸送樣。2.石蠟切片常溫保存運(yùn)輸
3.冰凍切片-20℃保存運(yùn)輸
4.細(xì)胞爬片固定液浸泡，4℃保存運(yùn)輸
關(guān)鍵詞：脫色搖床