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進(jìn)口牛用B超機(jī)做活體采卵的步驟

發(fā)布時(shí)間:2025-04-03
采卵之前,先往收集管中注入5mlpbs+肝素液(5mg/ml),置恒溫槽中,溫度37℃,將長(zhǎng)針與導(dǎo)管用pbs+肝素液沖洗2遍后準(zhǔn)備采卵。母牛站立保定,操作人員對(duì)牛進(jìn)行直腸檢查,并掏凈直腸內(nèi)的糞便;清洗外陰,并用0.1%新潔爾滅消毒外陰,然后將采卵針的探頭插入到陰道深部,到達(dá)陰道穹窿后,根據(jù)所要穿刺的卵巢左側(cè)還是右側(cè)而把探頭放在穹窿的相應(yīng)一側(cè)。操作人員一手持探頭,另一手在直腸內(nèi)隔著直腸壁將卵巢牽引至貼在探頭端部。
在進(jìn)口牛用b超機(jī)監(jiān)視器上能清楚看到卵巢,然后上下左右翻轉(zhuǎn)卵巢,根據(jù)圖像區(qū)分及確定卵泡數(shù)和黃體,并把卵泡進(jìn)行分級(jí),卵泡直徑2~5mm為小卵泡,5~10mm為中卵泡,大于10mm的卵泡為大卵泡,然后調(diào)整卵巢和探頭位置,使監(jiān)視器上卵泡位于穿刺引線上之后,推進(jìn)穿刺針,對(duì)卵泡進(jìn)行穿刺。同時(shí)用腳踏開關(guān)控制真空泵抽取卵泡液,真空泵壓力在35~60mm汞柱之間調(diào)整;從監(jiān)視器上可觀察到被抽取卵泡液的卵泡開始縮小,變得不規(guī)則,直到卵泡液被*抽取,卵泡在監(jiān)視器上消失,退出穿刺針,再對(duì)第二個(gè)卵泡進(jìn)行穿刺,抽取卵泡液,直到該卵巢上2mm以上的卵泡均被穿刺后,換另一側(cè)卵巢,同法處理。
然后用pbs+肝素液沖洗采卵針及導(dǎo)管,沖洗液也放入收集管,將采得的卵泡液用胚胎收集濾杯過(guò)濾,卵母細(xì)胞在濾杯中,用pbs液反復(fù)沖洗幾遍,將濾杯中的卵母細(xì)胞倒入表面皿中,在體視鏡下進(jìn)行觀察、檢卵。將檢出的符合要求的卵母細(xì)胞放進(jìn)成熟液中,在5%co2和39℃溫度的培養(yǎng)箱中進(jìn)行成熟培養(yǎng)。
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