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融合蛋白和重組蛋白的區(qū)別?重組融合蛋白的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2025-04-05
融合蛋白和重組蛋白的區(qū)別有哪些?一分鐘讓你了解:
重組蛋白是什么?重組蛋白是利用基因工程技術(shù)產(chǎn)生的,通常是由轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳腺產(chǎn)生,其作為生物制藥在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中作用顯著。
利用基因工程技術(shù),可以使哺乳動(dòng)物本身變成“批量生產(chǎn)藥物的工廠”。
方法:是將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,通過顯微注射等方法,導(dǎo)入哺乳動(dòng)物(哺乳動(dòng)物才會(huì)泌乳)的受精卵中,然后,將受精卵送入母體內(nèi),使其生長發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)入泌乳期后,可以通過分泌的乳汁來生產(chǎn)所需要的蛋白質(zhì)藥品,因而稱為動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器或乳房生物反應(yīng)器。
融合蛋白是什么?
融合蛋白又稱為“標(biāo)簽蛋白”,常用的標(biāo)簽有his、gst、strep標(biāo)簽。
融合蛋白是通過dna重組技術(shù)將要表達(dá)的目的蛋白基因和表達(dá)載體上融合蛋白基因相連,通過這種方式表達(dá)出來的蛋白質(zhì),就是既含有目的基因蛋白又含有融合基因蛋白的重組蛋白。
融合蛋白表達(dá)是重組蛋白表達(dá)的一種策略,融合表達(dá)是一種方法。
大體上有兩種類型的融合蛋白:di一種是由兩個(gè)蛋白或蛋白亞單位端對(duì)端融合,通常由一個(gè)linker連接,第二種是來自兩個(gè)供體的氨基酸穿插在融合蛋白產(chǎn)物中。
重組融合蛋白的應(yīng)用
①蛋白融合技術(shù)的應(yīng)用
融合蛋白的三個(gè)最重要的應(yīng)用:
1. 有助于克隆基因純化
2. 體現(xiàn)表達(dá)水平
3. 作為組織化學(xué)標(biāo)簽,使蛋白在細(xì)胞、組織或生物體中的位置可視化
融合蛋白,如葡萄球菌蛋白a、谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶(gst)、麥芽糖結(jié)合蛋白(mbp)和纖維素結(jié)合蛋白,在純化時(shí)可以通過親和色譜法輕松方便地進(jìn)行純化。重組融合蛋白zui常被用作報(bào)告結(jié)構(gòu)的融合伴侶是β-半乳糖苷酶、熒光素酶和綠色熒光蛋白 (gfp)。
②熒光融合蛋白
在融合蛋白中,zui常見的一類是熒光蛋白,如綠色熒光蛋白(gfp)、橙色熒光蛋白(ofp) 和黃色熒光蛋白(yfp)。熒光蛋白,如綠色熒光蛋白 (gfp),使人們能夠直接觀察細(xì)胞內(nèi)的動(dòng)態(tài)過程。
綠色熒光蛋白(gfp)是一種熒光蛋白,最初從維多利亞水母的發(fā)光器官中分離出來。與熒光素酶不同,gfp的優(yōu)勢(shì)在于它不需要任何底物、熒光素,以及atp、o2或mg2+。gfp在被藍(lán)光或紫外光激發(fā)時(shí)發(fā)出綠光,且在許多情況下可用于活的、完整的細(xì)胞和生物體,正是因?yàn)間fp作為自發(fā)熒光蛋白的功能。
③融合蛋白標(biāo)簽
在融合標(biāo)簽中,既有短序列(例如polyhis、polyarg、flag、c-myc、streptag等)也有大蛋白(gst、mbp 等)。在許多情況下,短的序列不影響分子的三級(jí)結(jié)構(gòu)及其生物特征,而大的融合分子更經(jīng)常用于提高所需蛋白的溶解度。與短序列的標(biāo)簽不同,有必要將大的融合標(biāo)簽從重組蛋白中去除。
我們有許多融合標(biāo)簽,其中既包含已被證實(shí)的標(biāo)簽,也包含最近開發(fā)的具有不同特點(diǎn)和不同優(yōu)缺點(diǎn)的標(biāo)簽。
更多關(guān)于融合蛋白和重組蛋白的信息可以查看:cn.sinobiological com/resource/protein-review/fusion-protein
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