人胰島素原 (pi)elisa使用說明書
胰島素原(pi)是胰島素的前體激素，它是由由胰島β細(xì)胞合成和分泌，主要在腎臟分解代謝。生理情況下，只有極少量的胰島素原釋放入血，在病理情況下，胰島β細(xì)胞釋放胰島素原增多，血中胰島素原水平升高。它是細(xì)胞在裂解成成熟胰島素之前分泌的最后一個單鏈蛋白結(jié)構(gòu)。它是由芝加哥大學(xué)的donaldf. steiner教授在1967年發(fā)現(xiàn)的。
本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（elisa）。往預(yù)先包被有人胰島素原(pi)捕獲抗體的微孔中，依次加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記的檢測抗體，hrp酶結(jié)合物，中間經(jīng)過溫育和洗滌，用底物tmb顯色，tmb在過氧化物酶(hrp)的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色 的深淺和樣品中的人胰島素原(pi)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定
吸光度（od值），計算樣品濃度。
靈敏度：4.79pg/ml
檢測范圍：12.5-800pg/ml
特異性：可檢測樣本中人的pi，且與其類似物無明顯交叉反應(yīng)。
濃度(pg/ml)
800
400
200
100
50
25
12.5
0
od值
2.32
1.93
1.31
0.85
0.51
0.39
0.28
0.1
校正od值
2.22
1.83
1.21
0.75
0.41
0.29
0.18
-
試劑盒性能：
1. 重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于 10%，板間變異系數(shù)小于 10%。
2. 回收率：在選取的健康人血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入 3 個不同
濃度水平的人pi，計算回收率。
樣本類型
范圍（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84-101
96
血漿(n=8)
92-105
102
細(xì)胞培養(yǎng)上清(n=8)
96-108
105
3.線性稀釋：分別在選取的4份健康人血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入
高濃度人pi，在標(biāo)準(zhǔn)曲線動力學(xué)范圍內(nèi)進(jìn)行稀釋，評估線性。
稀釋比例
回收率（%）
血清
血漿
細(xì)胞培養(yǎng)上清
1：2
范圍
84-95
88-97
90-110
平均回收率
91
93
96
1：4
范圍
89-103
87-108
105-115
平均回收率
94
98
109