分離出具生殖潛能干細胞
在母體中發(fā)育了50天的豬胎兒皮膚組織中分離出一些干細胞,這些干細胞具有某種分化成具有卵母細胞特性的細胞的內(nèi)在機制。
用誘導分化的條件培養(yǎng)基培養(yǎng)這些干細胞時,發(fā)現(xiàn)其中的一個亞群可以表達一些只有sheng殖細胞才能特異表達的基因和蛋白。
根據(jù)形態(tài)學觀察,發(fā)現(xiàn)所培養(yǎng)的細胞從誘導分化的第10天開始,形成了克隆樣結構,其中的一些克隆樣結構逐漸從培養(yǎng)皿上脫壁,呈“囊泡狀聚集體”懸浮于培養(yǎng)基中。在很多囊泡狀聚集體中央有一個較大的細胞,這與同sheng殖有關的卵母細胞復合體結構非常相似。
如果將這些囊泡狀聚集體放入供卵母細胞生長的培養(yǎng)基中,經(jīng)過長時間的培養(yǎng),囊泡狀聚集體中的細胞亞群可以將位于中央部分的大細胞擠出;進一步培養(yǎng)這些“大細胞”,最終可以長成直徑為80-100?滋m的細胞。
為了檢測這些大細胞是否表達了具有卵母細胞代表性的標記分子,將這些大細胞挑出,分組提取rna。
rt-pcr的檢測結果表明,在這些“大細胞”以及作為陽性對照的卵巢組織中,均可以檢測到所有卵母細胞特異表達的標記分子物。